试剂盒使用固定的胃蛋白酶树脂。胃蛋白酶是一种蛋白水解酶,通常用来从IgG 分子中生成
F(ab)2 片段。胃蛋白酶能够切割靠近铰链区的重链区域。在铰链区连接重链的1 个或多个二
硫键得到了保留。因此抗体的两个Fab 区域仍然能够连接在一起,产生1 个2 价分子(包含
2 个抗体结合位点),从而得到一个F(ab)2。轻链保持完整性仍然和重链连接在一起。然而Fc
区域被消化成小的肽段。这种固定的胃蛋白酶提供优异的为F(ab)2 片段消除酶污染的优点。
胃蛋白酶消化后,F(ab)2 可以用提供的Protein A 离心柱从未消化的IgG 分子和大的Fc 片段
中分离出来。Protein A 树脂结合IgG 分子和Fc 片段,加上离心柱的设计从而使F(ab)2 迅速
得到收集。
除此之外,SpinOUT™ GT-600 脱盐柱在试剂盒中提供来保证初始的抗体样本在最适的反应条
件下用于F(ab)2 片段化制备。
F(ab)2 片段化制备试剂盒针对小鼠,兔子,人IgG 进行了优化,当样本浓度在0.25-4mg/ 0.5ml
时,使用F(ab)2 片段化制备试剂盒,而当样本浓度在25-250μg/125μl 时,使用F(ab)2 片段化
制备试剂盒(微量)。
Figure 1: F(ab)2 Fragmentation scheme.
产品货号 产品名称 包装
786-274 F(ab)2 片段化制备试剂盒 10 Reactions
786-275 F(ab)2 片段化制备试剂盒(微量) 10 Reactions